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抗禽白血病单克隆抗体
    发布时间: 2024-06-06 22:04    
抗禽白血病单克隆抗体

抗禽白血病毒单克隆抗体;禽白血病抗体;禽白血抗体

禽白血病毒(Avian leukosis virus,ALV)是一种反转录病毒,属于反转录病毒科禽 C 型反转录病毒属,以下是关于它的一些主要信息:

病毒特性

形态结构:病毒粒子呈球形,直径约 80 - 120 纳米,有囊膜,表面有糖蛋白刺突。核心为单链 RNA,由两条相同的 RNA 分子通过氢键结合而成,还含有反转录酶、整合酶等病毒复制所需的酶类。

基因组结构:禽白血病毒的基因组包含三个结构基因,分别是 gag 基因,编码病毒的核心蛋白;pol 基因,编码反转录酶、整合酶等;env 基因,编码病毒的囊膜糖蛋白。此外,还包含一些调控基因和非编码区域,这些区域对于病毒的复制、转录和包装等过程具有重要的调控作用。

病毒分类:根据病毒囊膜糖蛋白的抗原性差异,禽白血病毒可分为 A、B、C、D、E、J 等多个亚群,不同亚群在宿主范围、致病性和传播方式等方面存在一定差异。

传播途径

垂直传播:是禽白血病毒的重要传播方式,感染病毒的种鸡可通过种蛋将病毒传递给子代雏鸡,这是导致雏鸡早期感染和发病的主要原因。

水平传播:可通过接触感染,如病鸡与健康鸡直接接触,或通过污染的饲料、饮水、垫料等间接传播。此外,吸血昆虫如蚊子、蜱等也可能在传播过程中起到一定作用。

致病性

肿瘤形成:禽白血病毒主要引起禽类的多种肿瘤性疾病,如淋巴细胞性白血病、成红细胞性白血病、成髓细胞性白血病、骨髓细胞瘤等。病毒感染后,可通过整合到宿主细胞基因组中,激活原癌基因或干扰细胞正常的生长调控机制,导致细胞异常增殖和肿瘤形成。

免疫抑制:感染禽白血病毒后,病毒会在免疫器官如法氏囊、胸腺、脾脏等中复制,损害免疫细胞,导致机体免疫功能下降,使病鸡对其他病原体的易感性增加,容易并发或继发其他细菌、病毒等感染,加重病情。

生产性能下降:即使不表现明显的肿瘤症状,感染禽白血病毒的鸡群也常出现生长缓慢、体重减轻、产蛋量下降、蛋品质降低等情况,给养禽业带来严重的经济损失。

诊断方法

临床观察:观察鸡群的精神状态、采食情况、生长发育、产蛋性能等,以及是否出现肿瘤相关症状,如腹部膨大、皮肤结节、贫血、出血等,但这些症状并非禽白血病毒感染所特有,需要结合其他诊断方法进行综合判断。

病毒分离与鉴定:采集病鸡的血液、组织等样本,接种到鸡胚或细胞培养物中进行病毒分离培养,然后通过免疫荧光、免疫组化、中和试验等方法对分离到的病毒进行鉴定。

血清学检测:常用的方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、琼脂扩散试验、血凝抑制试验等,可检测鸡血清中的禽白血病毒抗体,用于鸡群的感染监测和流行病学调查。

分子生物学检测:如聚合酶链反应(PCR)、实时荧光定量 PCR 等,可直接检测病鸡组织或血液中的病毒核酸,具有特异性强、灵敏度高的优点,能够早期诊断和准确检测病毒感染。

禽白血病毒抗体:

检测原理:将禽白血病毒的特异性抗原包被在酶标板上,加入待检血清样本,若样本中含有禽白血病毒抗体,抗体就会与包被的抗原结合,再加入酶标记的二抗,与结合在抗原上的抗体反应,最后加入底物显色,通过酶标仪测定吸光度值来判断样本中是否含有禽白血病毒抗体以及抗体的含量。

试剂盒组成

包被板:已包被禽白血病毒抗原的微孔板。

标准品:已知浓度的禽白血病毒抗体标准血清,用于绘制标准曲线。

酶标二抗:标记有酶(如辣根过氧化物酶)的抗禽免疫球蛋白抗体。

底物液:一般为过氧化物酶的底物,如四甲基联,苯胺(TMB),在酶的作用下会发生显色反应。

终止液:通常为硫酸或盐酸溶液,用于终止底物的显色反应。

洗涤液:用于洗涤微孔板,去除未结合的物质。

检测范围:不同试剂盒的检测范围有所差异,一般能检测出血清中禽白血病毒抗体的浓度在 0.1 - 100 ng/mL 或更高的范围,具体取决于试剂盒的灵敏度和标准品的设定。

灵敏度:通常能检测到低至 0.1 - 1 ng/mL 的禽白血病毒抗体,即当血清中抗体浓度达到这个水平时,试剂盒能够准确检测到并显示阳性结果。

特异性:对禽白血病毒抗体具有高度特异性,与其他禽类病毒抗体如禽流感病毒抗体、新城疫病毒抗体等交叉反应率通常低于 5%,能准确区分禽白血病毒抗体与其他无关抗体。

重复性:在相同条件下,对同一批样本进行多次检测,结果的变异系数(CV)通常小于 10%。即多次检测的结果较为稳定,误差较小,保证了检测结果的可靠性。

样本要求

血清或血浆:采集鸡的血液,分离血清或血浆作为检测样本。一般要求采集的血液在 4℃下静置 1 - 2 小时,待血液凝固后离心分离血清;血浆则需使用抗凝剂(如肝素、EDTA 等)抗凝后离心获得。

样本量:通常每份样本的用量为 50 - 100 μL,具体用量根据试剂盒的要求而定。

样本保存:短期保存可在 4℃下存放 1 - 2 天,长期保存需在 - 20℃或更低温度下冷冻保存,避免反复冻融,以免影响抗体活性。

品牌:PhyCell/费雪

纯化方法(Purification):亲和层析纯化 

亚型:IgG2a

胶体金灵敏度:1-3ng/ml

ELISA IC50:1-2ppb

规格:1mg

该抗体可应用于ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。

性状:液体,避免反复冻融

来源:BALB/C小鼠

ELISA效价: 0.005M PBS 体系下1:5000 以上  

缓冲液:0.01M PBS PH7.4

储存条件:-20℃以下

有效期:3年,-50℃以下保存