诺如病毒单克隆抗体；NV-McAb

一、诺如病毒概述

病毒分类：诺如病毒属于杯状病毒科（Caliciviridae），是一种无包膜的单股正链 RNA 病毒。

传播途径：主要通过粪 - 口途径传播（如接触污染的食物、水或物体表面），也可通过气溶胶或密切接触传播。

感染特点：

引起急性胃肠炎，常见症状为呕吐、腹泻、腹痛、低热，儿童更易出现呕吐，成人以腹泻为主。

传染性极强，少量病毒即可致病，易在学校、医院、邮轮等人群密集场所暴发流行。

二、诺如病毒的基因分型

诺如病毒根据衣壳蛋白（VP1）基因分为10 个基因组（Genogroup，GⅠ~GⅩ），其中感染人类的主要是：

GⅠ 型（GI）：也称 “诺如病毒 Ⅰ 型”，常见基因型包括 GI.1、GI.2 等。

GⅡ 型（GⅡ）：也称 “诺如病毒 Ⅱ 型”，是全球流行的主要类型，常见基因型为 GⅡ.4（如 2006 年变异株、2012 年悉尼株等）。

其他基因组：如 GⅣ、GⅨ 等偶尔感染人类，但较为罕见。

诺如病毒单克隆抗体（Norovirus Monoclonal Antibody, NoV-McAb）

1. 基本概念

定义：

诺如病毒单克隆抗体是由单一杂交瘤细胞克隆产生的、针对诺如病毒（Norovirus, NoV）特定抗原表位的高度特异性抗体。诺如病毒属于杯状病毒科，是引起急性胃肠炎的主要病原体之一，其表面抗原（如衣壳蛋白 VP1、VP2）是单克隆抗体制备的关键靶点。

制备流程：

抗原制备：重组表达诺如病毒衣壳蛋白（如 VP1 的 P 区结构域，具有高度免疫原性）。

动物免疫：免疫小鼠（如 Balb/c 小鼠），诱导特异性 B 淋巴细胞产生抗体。

细胞融合：将免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株。

单克隆化与鉴定：通过有限稀释法克隆化杂交瘤细胞，利用 ELISA、Western blot 等技术验证抗体与诺如病毒抗原的结合特异性。

大规模生产：通过小鼠腹腔注射（腹水法）或体外培养（悬浮细胞培养）获取单克隆抗体。

2. 特性与分类

特性：

高度特异性：仅识别诺如病毒某一特定抗原表位（如 VP1 的中和表位），避免与其他肠道病毒（如轮状病毒）交叉反应。

均一性：批次间抗体纯度、效价一致，适合标准化检测和治疗应用。

高亲和力：通过亲和力成熟筛选，部分单克隆抗体可高效中和病毒颗粒。

分类（按靶点）：

靶点抗原 功能与应用

VP1-P 区 诺如病毒衣壳蛋白的主要中和表位，抗体可阻断病毒与宿主细胞受体（如组织血型抗原 HBGA）结合。

VP1-C 区 衣壳蛋白保守区，用于广谱检测不同基因型诺如病毒（如 GⅠ、GⅡ 型）。

VP2 内壳蛋白，参与病毒组装，抗体可用于研究病毒颗粒结构。

3. 主要应用领域

诊断与检测：

临床检测：

开发高灵敏度的 ELISA、免疫荧光（IFA）或胶体金试纸条，用于粪便、呕吐物中诺如病毒的快速检测。

优势：单克隆抗体可区分诺如病毒不同基因型（如 GⅡ.4 型为主的流行株），辅助疫情溯源。

环境监测：

检测水源（如饮用水、海水）和食品（如贝类、沙拉）中的诺如病毒污染，防控食源性疾病。

治疗与预防：

被动免疫治疗：

针对免疫缺陷患者或重症感染者，输注中和性单克隆抗体可快速清除病毒（目前主要在动物模型中验证，如小鼠、仔猪模型）。

疫苗研发工具：

筛选能诱导中和抗体的疫苗抗原（如病毒样颗粒 VLP 疫苗），评估疫苗诱导的抗体应答强度和表位特异性。

基础研究：

解析诺如病毒与宿主相互作用机制（如病毒附着、内吞过程）。

研究病毒突变对抗体中和效力的影响（如逃逸突变株的监测）。