阴道毛滴虫抗原（TV-Ag）

一、阴道毛滴虫抗原的分类与结构

1. 表面膜蛋白抗原

• 黏附相关蛋白

• 家族成员包括 CP1、CP2 等，酶活性中心含保守半胱氨酸残基，可降解宿主细胞外基质（如纤连蛋白、层粘连蛋白），破坏黏膜屏障，并暴露黏附受体。

• CP30（30 kDa）是主要免疫原性蛋白，可诱导宿主产生 IgG 和 IgA 抗体，但酶活性可能抵消抗体的中和作用。

• 分子量约 65 kDa，通过结合宿主血红蛋白释放的铁离子调控滴虫代谢，同时作为黏附素识别阴道上皮细胞表面的硫酸乙酰肝素（HS）和整合素 α5β1，介导定植。

• 铁调蛋白（Iron-Regulated Protein，IRP）

• 半胱氨酸蛋白酶（Cysteine Protease，CPs）

• 免疫原性蛋白

• 由多基因家族编码，通过抗原变异逃避宿主免疫识别，导致慢性感染和反复定植。

• 高度保守的跨膜蛋白，免疫原性强，可诱导 Th1 型细胞免疫应答（IFN-γ 分泌增加），是疫苗开发的核心靶点之一。

• 表面抗原 2（TAgs2）

• 表面变异抗原（Variant Surface Antigen，VSA）

2. 分泌型抗原（毒力因子）

• 半胱氨酸蛋白酶（CPs）

• 除上述黏附功能外，CPs 可降解 IgG、补体成分（如 C3b）及趋化因子（如 IL-8），抑制宿主免疫应答。

• CP14（14 kDa）可直接损伤宿主红细胞，引起阴道分泌物血性或泡沫状改变。

• 活性氧（ROS）相关酶

• 超氧化物歧化酶（SOD）：清除宿主免疫细胞产生的超氧阴离子（O₂⁻），抵抗氧化杀伤。

• 过氧化物酶（Px）：降解过氧化氢（H₂O₂），保护滴虫免受中性粒细胞呼吸爆发的攻击。

3. 代谢相关抗原

• 丙酮酸铁氧还蛋白氧化还原酶（PFOR）

• 参与滴虫糖酵解途径，生成丙酮酸和 ATP，其抗原表位可诱导特异性抗体，但免疫保护机制尚不明确。

• 铁硫蛋白（Fe-S Protein）

• 作为电子传递链关键组分，与滴虫对铁依赖的生存策略相关，抗原性较弱但保守性高。

二、阴道毛滴虫抗原的特性与功能

1. 免疫原性与免疫逃逸

• 免疫原性：

• TAgs2 和 CP30 可诱导显著的体液免疫应答，但滴虫感染常伴随局部免疫抑制（如阴道分泌物中 IL-10 升高、T 细胞功能耗竭），导致抗体和细胞免疫保护不足。

• 免疫逃逸机制：

• 抗原变异：VSA 通过基因重组或转录调控高频变异，避免抗体持续识别（类似非洲锥虫的 VSG 抗原变异）。

• 补体抑制：表面蛋白吸附宿主补体调节因子（如衰变加速因子 DAF），抑制膜攻击复合物（MAC）形成。

• 免疫抑制分子分泌：释放前列腺素 E₂（PGE₂）抑制树突状细胞（DC）成熟和抗原呈递。

2. 致病相关性

• 黏附与定植：

• IRP 通过 “双受体结合” 模式（铁离子 + 宿主受体）锚定阴道上皮细胞，CPs 降解细胞间连接蛋白（如 E - 钙黏蛋白），促进滴虫侵入黏膜下层。

• 炎症与组织损伤：

• 表面脂肽（LPP）激活 TLR2/4 受体，诱导 IL-6、TNF-α 等促炎因子释放，引发阴道黏膜充血、水肿。

• CPs 直接溶解宿主细胞，导致上皮脱落，增加 HIV、HPV 等性传播病原体的感染风险（黏膜屏障破坏）。

3. 诊断与疫苗靶点

• 血清学诊断抗原：

• 重组 CP30 或 TAgs2 蛋白用于 ELISA 检测抗体，但需注意与其他原虫（如蓝氏贾第鞭毛虫）的交叉反应。

• 疫苗候选抗原：

• 多表位疫苗：串联 TAgs2 保守区、CP30 催化结构域及 VSA 共同表位，覆盖主要流行株。

• DNA 疫苗：编码 TAgs2 的质粒 DNA 联合电穿孔递送，在小鼠模型中可诱导黏膜 IgA 和系统性细胞免疫。

三、阴道毛滴虫抗原的应用场景

1. 实验室诊断

• 传统诊断方法：

• 免疫层析法（ICA）：使用抗 CP30 单克隆抗体检测阴道分泌物中的 TV-Ag，灵敏度约 75-85%，10 分钟内出结果，适用于床旁检测（POCT）。

• ELISA：双抗体夹心法检测 TAgs2 抗原，特异性高于 microscopy，适合大规模筛查。

• 湿片显微镜检：直接观察滴虫运动，但灵敏度仅 50-60%，漏诊率高。

• 抗原检测：

• 分子与抗原联合检测：

• PCR 扩增滴虫特异性18S rRNA基因联合抗原检测，提高无症状携带者（滴虫载量低）的检出率。

2. 疫苗研发进展

• 亚单位疫苗：

• TAgs2 重组蛋白联合铝佐剂在恒河猴模型中可减少阴道定植负荷，但对免疫缺陷宿主（如 HIV 感染者）保护效力下降。

• 活载体疫苗：

• 减毒沙门氏菌携带 TAgs2 基因，口服后诱导系统性和黏膜免疫，适用于男女泌尿生殖道交叉保护。

3. 免疫治疗探索

• 单克隆抗体靶向 IRP 阻断黏附，联合甲硝唑治疗可缩短清除时间，减少复发（临床前研究阶段）。