抗非洲猪瘟病毒（ASFV）单克隆抗体；非洲猪瘟抗体；非洲猪瘟P30抗体；猪ASFV抗体

非洲猪瘟(ASF)是由感染非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种急性、强毒、高致命性传染病，致死率为100%。

非洲猪瘟病毒 P30 蛋白是一种重要的结构蛋白，在病毒的生命活动和感染过程中发挥着关键作用，以下是关于它的详细介绍：

基本信息：P30 蛋白由 CP204L 基因编码，分子量约为 30 - 32kDa，也被称为 P32 蛋白。

结构特点：P30 蛋白含有部分 α- 螺旋转角和卷曲区域，其 C 末端被认为是免疫优势区域。研究确定了一个由单抗 MCAB1B4G2 - 4 识别的线性表位 164HNFIQTI170，该表位在不同毒株间高度保守，

且暴露在蛋白表面，具有较强的抗原性。

功能特性：P30 蛋白是构成非洲猪瘟病毒内囊膜的主要结构蛋白，具有高度免疫原性。它在病毒复制早期表达，并参与病毒吸附的内化过程，与病毒进入宿主细胞密切相关，针对 P30 的抗体能够抑制病毒的内化。

此外，P30 蛋白还与多种宿主蛋白相互作用，如 DAB2、RPSA、PARP9 等，协助病毒进入宿主细胞、促进病毒复制、影响宿主正常的核质运输并逃避宿主的先天免疫反应。

应用：由于 P30 蛋白具有良好的抗原性，能诱导机体产生中和抗体，所以是检测非洲猪瘟病毒抗体的关键靶点，也是早期血清学诊断所必需的抗原蛋白，常被用于开发各种血清学诊断试剂盒。

同时，P30 蛋白也经常与其他结构蛋白一起用于疫苗研究。

非洲猪瘟 P30 抗体细胞株的相关信息：

1H3B4、3F2F5、6E3A1 和 9D6B9 细胞株：通过构建 p30 原核表达质粒，转化至大肠杆菌 BL21（DE3）感受态细胞中诱导表达，经镍柱亲和层析获得目的蛋白。将 p30 复性后免疫 BALB/c 小鼠，取免疫小鼠的脾脏与骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体，经筛选得到 4 株能稳定分泌针对非洲猪瘟病毒 p30 蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株，分别命名为 1H3B4、3F2F5、6E3A1 和 9D6B9。经鉴定，3F2F5 和 9D6B9 两株单克隆抗体的重链均为 IgG2b，轻链均为 kappa；6E3A1 株单克隆抗体的重链为 IgM，轻链为 kappa；1H3B4 株单克隆抗体的重链为 IgG2b，轻链为 lambda。

2-3 株细胞株：将 p30 基因克隆进原核表达载体 pCold I 中，经诱导表达、纯化获得纯化的 p30 蛋白，以此免疫小鼠制备单克隆抗体。经筛选得到的单克隆杂交瘤细胞株能稳定分泌 p30 抗体，其分泌的单抗重链为 IgG2b 亚型，轻链为 kappa 亚型，可识别真核细胞中表达的 p30 蛋白，能用于 western blotting 检测 p30 蛋白，且在竞争 ELISA 检测中，阳性猪血清能高效阻断该单克隆抗体与 p30 蛋白结合。

一株分泌 p30 单克隆抗体的杂交瘤细胞株：将 p30 蛋白免疫 BALB/c 小鼠，取产生高水平抗体小鼠的脾细胞与 SP2/0 细胞融合，通过 p30 抗体 ELISA 筛选阳性克隆杂交瘤，并通过稀释法获得纯化的杂交瘤细胞克隆。经筛选得到一株能分泌与非洲猪瘟病毒阳性血清竞争性抗体的杂交瘤细胞株，其分泌的抗体重链为 IgG2b 亚型，轻链为 kappa 亚型，可识别真核细胞中的 p30 蛋白，能用于 western blotting 检测 p30 蛋白，可应用于建立 p30 抗体阻断 ELISA 检测方法。

 非洲猪瘟 P30 病毒单克隆抗体的技术参数：

抗体亚型：如 1H3B4 株单克隆抗体的重链为 IgG2b，轻链为 lambda；3F2F5 和 9D6B9 株单克隆抗体的重链均为 IgG2b，轻链均为 kappa；6E3A1 株单克隆抗体的重链为 IgM，轻链为 kappa。

特异性：能特异性识别非洲猪瘟病毒 P30 蛋白，与 ASFV 感染细胞发生特异性反应，而与未感染病毒的细胞不发生反应。

免疫原：通常是原核表达并纯化的 P30 重组蛋白。以该蛋白为免疫原，免疫 6-8 周龄的 BALB/c 雌鼠来制备单克隆抗体。

细胞来源：通过将免疫后的 BALB/c 小鼠脾淋巴细胞与 SP2/0 骨髓瘤细胞融合，经筛选得到能稳定分泌抗 P30 蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。

效价：例如 2G10-2 和 6D2-1 两株单克隆抗体的效价分别为 1∶5000和 1∶2000。不同研究制备的单克隆抗体效价可能有所不同，一般腹水效价在 1∶5000。

抗原表位：如 MAbs 8F4、1H2 和 6C3 的抗原识别区域为 P30 蛋白的第 120-153 位氨基酸；MAbs 8E11 与 1D3 的抗原识别区域为第 86-119 位氨基酸。也有研究表明，部分单克隆抗体主要识别 P30 蛋白 61-93 区域和 C 端区域的氨基酸残基片段。

产品形式：可以是腹水形式，也可以是经过纯化后的抗体溶液。

纯度：通常采用亲和纯化等方法对抗体进行纯化，纯化后的抗体纯度较高，可满足各种实验和检测需求。

储存条件：一般短期可在 4℃保存，长期保存需在 - 20℃或更低温度，应避免反复冻融，以保持抗体的活性。

免疫原： 非洲猪瘟全病毒或非洲猪瘟P30病毒蛋白

可用于免疫荧光，WB,ELISA,等科研项目

规格：1mg/瓶，纯度>95%

推荐使用浓度： 胶体金： 5微克/ml金液；

【工作效价】 

ELISA法：1：500~5000

免疫印迹：1：200~5000。

免疫组化：1：20~500。

标记二抗的使用浓度：国产1:100-1:500；进口1:1000-1:5000

具体效价以产品标签为准，Z佳使用条件需根据所检测样本的抗原及一抗效价优化而定。

纯化方式：亲和层析纯化

来源： balb/c小鼠

缓冲液：0.01PBS+保护剂

【常见问题】

1. 包被抗体或抗原不适，易产生阳性值较小，或产生变异，即跳管现象。

2. 用抗血清不纯化，或纯化程度太低的抗体包被，则阳性值较小，或没有阳性梯度。

3. 封闭不好或标记物过浓可产生对照值较高。

【保存条件】-20℃保存，保持期为24个月.