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甲基对硫磷抗体;甲基对硫磷抗原
    发布时间: 2025-05-30 22:34    
甲基对硫磷抗体;甲基对硫磷抗原

甲基对硫磷抗体;甲基对硫磷抗原

甲基对硫磷抗原

结构与合成:根据甲基对硫磷的结构特征,通常从其硝基一端或磷酸酯基甲氧基一端引入一定长度的间隔臂和活性基团来设计合成半抗原。

例如,以 3 - 巯基丙酸为功能团试剂,从甲基对硫磷的甲氧基部位引入间隔臂和活性基团,可合成半抗原 O - 甲基 - N-(2 - 羧乙基) 硫代 - O-(4 - 硝基苯基) 硫代磷酸酯(简称 MP)。

然后将半抗原与载体蛋白质如牛血清白蛋白(BSA)、中国鲎血蓝蛋白(TTH)等通过特定方法偶联,即可制备出人工抗原2。

作用:甲基对硫磷抗原主要用于诱导机体产生免疫应答,刺激动物体内的免疫系统产生针对甲基对硫磷的特异性抗体。在免疫分析方法的建立中,如酶联免疫吸附分析(ELISA)等,作为包被抗原用于检测样品中甲基对硫磷抗体的存在及含量,

或者用于筛选具有高亲和力和特异性的抗体细胞株。

甲基对硫磷抗体

制备:将合成的甲基对硫磷人工抗原免疫动物,如 BALB/C 小鼠、新西兰兔等,动物的免疫系统会识别抗原并产生免疫反应,其中的 B 淋巴细胞会分泌出针对甲基对硫磷的抗体。经过细胞融合技术,将免疫后的脾脏淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞。再通过 HAT 培养液选择性培养、间接 ELISA 法筛选和有限稀释克隆等步骤,可获得稳定分泌甲基对硫磷单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进而大量生产单克隆抗体。多克隆抗体则可通过收集免疫动物后的血清获得。

特性

特异性:理想的甲基对硫磷抗体应具有高度的特异性,只与甲基对硫磷或其特定的代谢产物发生反应,而不与其他结构类似的化合物产生交叉反应,从而能够准确地检测出样品中的甲基对硫磷。

例如,有研究制备的甲基对硫磷单克隆抗体对绝大部分结构类似的有机磷农药均不发生交叉反应,但可同时检测毒性更大的对硫磷。

亲和力:亲和力是衡量抗体与抗原结合能力的重要指标,亲和力越高,抗体与抗原的结合就越紧密、越稳定。高亲和力的甲基对硫磷抗体能够更灵敏地检测出低浓度的甲基对硫磷,提高检测方法的灵敏度。

如某研究中获得的甲基对硫磷单克隆抗体的亲和力常数为 1.67×10⁵L/mol3