多效唑单抗(60C5细胞株);多效唑单克隆抗体;多效唑抗体;Paclobutrazol(PBZ)抗体;多效唑抗原
英文名称:Paclobutrazol(PBZ)
效价高,灵敏度好,间接竞争ELISA的IC50值为0.5ppb左右。
多效唑抗原是用于制备针对多效唑的抗体的关键物质。
基本概念
多效唑是一种植物生长调节剂,在农业生产中广泛应用。多效唑抗原是将多效唑与载体蛋白通过化学方法偶联后形成的免疫原性物质。由于多效唑本身是小分子物质,不具有免疫原性,无法直接刺激动物机体产生免疫反应,因此需要与载体蛋白结合,形成具有较大分子量和免疫原性的复合物,即多效唑抗原,才能诱导动物产生针对多效唑的抗体。
制备方法
选择载体蛋白:常用的载体蛋白有牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、钥孔血蓝蛋白(KLH)等。这些蛋白具有良好的免疫原性,能够携带多效唑分子引发免疫反应。
多效唑与载体蛋白的偶联:通常采用化学交联的方法将多效唑与载体蛋白连接。例如,可通过碳二亚胺法,利用碳二亚胺类试剂将多效唑分子上的羧基(或其他可反应基团)与载体蛋白上的氨基进行缩合反应,形成稳定的酰胺键,从而实现多效唑与载体蛋白的偶联。在偶联过程中,需要严格控制反应条件,如 pH 值、温度、反应时间等,以确保偶联效果和抗原的质量。
抗原的纯化与鉴定:偶联反应完成后,需要通过透析、凝胶过滤等方法对多效唑抗原进行纯化,去除未反应的多效唑分子、交联试剂以及其他杂质。然后采用光谱分析、电泳等技术对抗原进行鉴定,确定其分子量、纯度以及多效唑与载体蛋白的偶联比例等指标,以保证抗原的质量和稳定性。
应用领域
免疫检测:多效唑抗原可用于制备多效唑抗体,进而开发免疫检测方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫层析试纸条等,用于快速、灵敏地检测环境样品(如土壤、水样)、农产品(如水果、蔬菜)中的多效唑残留量,为农产品质量安全监测和环境保护提供技术支持。
免疫分析:在研究多效唑在生物体内的代谢过程和作用机制时,多效唑抗原可用于制备特异性抗体,通过免疫组化、免疫荧光等技术,研究多效唑在植物或动物组织中的分布和定位,以及与相关生物分子的相互作用。
多效唑单抗(60C5 细胞株)是一种用于生产抗多效唑单克隆抗体的细胞株:
细胞株特性
来源:60C5 细胞株是通过细胞融合技术获得的杂交瘤细胞株。通常是将免疫后的小鼠脾细胞(其中含有能产生抗多效唑抗体的 B 淋巴细胞)与骨髓瘤细胞融合,经过筛选和克隆化培养得到能够稳定分泌多效唑单抗的 60C5 细胞株。
稳定性:该细胞株具有良好的稳定性,在体外培养条件下能够持续稳定地分泌多效唑单克隆抗体。经过多次传代培养后,依然能保持其分泌抗体的能力和特异性,可用于长期的抗体生产。
抗体分泌特性:60C5 细胞株分泌的多效唑单抗具有高度的特异性和亲和力,能够准确识别多效唑分子,与多效唑发生特异性结合,而对其他结构相似的化合物几乎不产生交叉反应。并且,该抗体与多效唑的结合能力较强,能够在较低浓度下有效地捕获多效唑。
多效唑单抗的应用
残留检测:多效唑作为一种广泛应用的植物生长调节剂,其在农产品和环境中的残留情况备受关注。多效唑单抗可用于开发各种免疫检测方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫层析试纸条等,用于快速、灵敏地检测农产品、土壤、水样等中的多效唑残留量。例如,在农产品质量安全检测中,通过这些免疫检测方法可以快速筛查出多效唑残留是否超标,保障消费者的健康。
环境监测:在环境科学领域,利用多效唑单抗可以监测多效唑在环境中的分布和迁移转化规律。通过检测土壤、水体等环境样品中的多效唑含量,了解其在环境中的残留水平和变化趋势,为评估多效唑对生态环境的影响提供数据支持,有助于采取相应的环境保护措施。
免疫分析研究:在生物学研究中,多效唑单抗可用于研究多效唑在生物体内的作用机制、代谢途径以及与相关生物分子的相互作用。例如,通过免疫组化、免疫荧光等技术,利用多效唑单抗可以观察多效唑在植物组织或动物器官中的分布情况,以及在细胞水平上研究其对相关信号通路的影响。
生产与培养
细胞培养条件:60C5 细胞株通常需要在特定的细胞培养基中培养,一般采用含有胎牛血清、抗生素等成分的 RPMI 1640 培养基或 DMEM 培养基等。培养条件为 37℃、5% 二氧化碳的恒温培养箱中,以提供细胞生长和抗体分泌所需的适宜环境。
大规模生产:为了获得大量的多效唑单抗,可采用细胞培养技术进行大规模生产。可以使用生物反应器进行悬浮培养,通过优化培养条件和工艺参数,提高细胞密度和抗体产量。另外,也可以将细胞接种到实验动物(如小鼠)腹腔内,形成腹水,从腹水中获取高浓度的抗体,但这种方法需要注意动物的福利和实验伦理问题。