副流感1型抗体；副流感2型单抗；副流感3型单抗；PIV-I-McAb

副流感病毒单克隆抗体（Parainfluenza Virus Monoclonal Antibodies, PIV-McAb）

一、副流感病毒概述

副流感病毒（Parainfluenza Virus, PIV）属于副黏液病毒科，分为1-4 型（PIV-Ⅰ 至 PIV-Ⅳ），是引起儿童和免疫缺陷人群呼吸道感染的重要病原体。其中：

PIV-Ⅰ：主要导致哮吼（急性喉气管支气管炎）；

PIV-Ⅱ：临床症状与 PIV-Ⅰ 相似，但流行范围较小；

PIV-Ⅲ：可引起细支气管炎和肺炎，感染率高于 Ⅰ、Ⅱ 型；

PIV-Ⅳ：症状较轻，研究较少。

单克隆抗体（McAb）针对病毒表面抗原（如血凝素神经氨酸酶蛋白 HN、融合蛋白 F、基质蛋白 M 等），具有高度特异性，广泛应用于诊断、治疗和研究。

二、副流感 1 型抗体（PIV-Ⅰ-McAb）

1. 靶点与特性

主要抗原靶点：

HN 蛋白：介导病毒与宿主细胞受体结合及神经氨酸酶活性，是中和抗体的关键靶点。

F 蛋白：负责病毒与宿主细胞膜融合，其构象表位可诱导中和抗体。

特性：

特异性识别 PIV-Ⅰ 型病毒株（如原型株 Sendai 病毒），与其他型别副流感病毒或呼吸道合胞病毒（RSV）无交叉反应。

2. 应用

诊断：

开发 ELISA、免疫荧光（IFA）试剂，用于检测临床样本（如鼻咽拭子）中的 PIV-Ⅰ 抗原或抗体。

流式细胞术检测感染细胞表面的病毒抗原，辅助病毒分型。

治疗研究：

中和性单克隆抗体可阻断病毒吸附和融合，在动物模型（如仓鼠、小鼠）中显示减轻肺部炎症的潜力。

三、副流感 2 型单克隆抗体（PIV-Ⅱ-McAb）

1. 靶点与特性

主要抗原靶点：

HN 蛋白：PIV-Ⅱ 的 HN 蛋白与 PIV-Ⅰ 存在差异，抗体可区分两型病毒。

F 蛋白：保守性低于 PIV-Ⅰ，抗体需针对特定株（如原型株 Hampshire）设计。

特性：

对 PIV-Ⅱ 型病毒（如 CAMP 株）具有高亲和力，适用于流行病学监测中区分 PIV-Ⅰ/Ⅱ 型。

2. 应用

诊断：

配合 PIV-Ⅰ 抗体，用于双抗体夹心 ELISA 鉴别两型病毒感染。

免疫组化染色检测组织样本中的病毒分布（如扁桃体、支气管上皮细胞）。

基础研究：

研究 PIV-Ⅱ 病毒株的抗原变异，分析 HN 蛋白受体结合域的结构差异。

四、副流感 3 型单克隆抗体（PIV-Ⅲ-McAb）

1. 靶点与特性

主要抗原靶点：

HN 蛋白：PIV-Ⅲ 的 HN 蛋白缺乏神经氨酸酶活性，但受体结合域（RBD）是中和抗体的关键表位。

F 蛋白：其融合肽段（FP）和 HR-A/B 结构域是广谱中和抗体的潜在靶点。

特性：

可识别 PIV-Ⅲ 型各亚型（如 A、B 亚型），部分抗体具有跨型中和活性（如对 PIV-Ⅰ/Ⅲ 交叉反应）。

2. 应用

诊断与监测：

胶体金试纸条或化学发光试剂用于快速检测 PIV-Ⅲ，尤其在婴幼儿急性呼吸道感染中。

病毒中和试验（VNT）评估临床分离株的抗体敏感性。

治疗与疫苗研发：

人源化单克隆抗体（如基于噬菌体展示技术的 PIV-Ⅲ-McAb）在临床试验中用于免疫缺陷患者的被动免疫。

作为标准品评估 PIV-Ⅲ 疫苗（如减毒活疫苗）诱导的中和抗体水平。

五、单克隆抗体制备与技术要点

1. 通用制备流程

抗原制备：

重组表达病毒表面蛋白（如 HN、F 蛋白的胞外域）或使用病毒样颗粒（VLP）作为免疫原。

杂交瘤技术：

免疫小鼠后，脾细胞与骨髓瘤细胞融合，通过有限稀释法筛选特异性杂交瘤克隆。

抗体工程优化：

人源化改造（如 CDR 移植）降低异源抗体的免疫原性，适用于治疗性应用。

2. 关键技术挑战

型间交叉反应：PIV-Ⅰ/Ⅱ 型 HN 蛋白同源性较高，需通过表位 Mapping 筛选型特异性抗体。

病毒培养限制：PIV-Ⅲ 型可在细胞系（如 HEp-2、Vero 细胞）中增殖，但 PIV-Ⅳ 型培养困难，需依赖重组抗原。

中和活性验证：需在细胞病变抑制试验（CPE）或空斑减少中和试验（PRNT）中验证抗体的中和效力。