鼠抗沙眼衣原体单克隆抗体；沙眼衣原体单克隆抗体；沙眼衣原体抗体；CHL-McAb   
Mouse anti-Chlamydia Trachomatis monoclonal antibody

沙眼衣原体是一种常见的致病性衣原体：
基本生物学特性
形态结构：沙眼衣原体具有独特的发育周期，包括原体和始体（网状体）两种形态。原体呈球形或椭圆形，直径约 0.3μm，具有坚韧的细胞壁，是感染性颗粒。始体较大，直径约 0.5 - 1.0μm，无细胞壁，代谢活跃，是衣原体在宿主细胞内的繁殖形式。
培养特性：沙眼衣原体为专性细胞内寄生菌，不能在无生命的培养基上生长。常用的培养方法有鸡胚卵黄囊接种、细胞培养等。在细胞培养中，沙眼衣原体可在 McCoy 细胞、HeLa 细胞等细胞系中生长繁殖，形成包涵体。
基因组特点：沙眼衣原体的基因组相对较小，约为 1.0 - 1.2 Mb，其基因组成紧凑，编码约 800 - 1000 个蛋白质。基因组中包含许多与致病性、代谢和细胞内生存相关的基因。
致病机制
黏附与侵入：沙眼衣原体通过其表面的黏附因子与宿主细胞表面的受体结合，然后通过受体介导的内吞作用进入宿主细胞。
胞内生存与繁殖：进入细胞后，沙眼衣原体在吞噬体中发育成始体，利用宿主细胞的营养物质进行繁殖。始体通过二分裂方式不断增殖，形成包涵体。
免疫病理损伤：沙眼衣原体感染可引起机体的免疫反应，一方面有助于清除病原体，但另一方面也可能导致免疫病理损伤。例如，感染引起的炎症反应可导致组织破坏和瘢痕形成。
所致疾病
沙眼：由沙眼衣原体血清型 A、B、Ba 和 C 引起。主要通过眼 - 眼或眼 - 手 - 眼传播，可导致眼睑结膜乳头增生、滤泡形成，严重时可引起角膜血管翳、睑内翻、倒睫等并发症，影响视力，是导致失明的重要原因之一。
泌尿生殖道感染：血清型 D - K 可引起尿道炎、宫颈炎、附睾炎、前列腺炎等泌尿生殖道感染。在男性，可表现为尿频、尿急、尿痛、尿道分泌物增多等症状；在女性，症状相对不典型，可出现阴道分泌物增多、异味、下腹痛等，若不及时治疗，可引起输卵管炎、盆腔炎等，导致不孕不育或宫外孕等严重后果。
性病淋巴肉芽肿：由沙眼衣原体 L1、L2 和 L3 血清型引起，主要通过性接触传播。初期表现为外生殖器溃疡，随后可出现腹股沟淋巴结肿大、化脓、破溃，形成瘘管，还可引起直肠炎、直肠狭窄等并发症。
检测方法
病原学检测：包括涂片镜检、细胞培养和核酸检测。涂片镜检可通过吉姆萨染色或碘染色观察细胞内的包涵体，但敏感性较低。细胞培养是诊断沙眼衣原体感染的 “金标准”，但操作复杂，耗时较长。核酸检测如聚合酶链反应（PCR）、荧光定量 PCR 等方法，具有敏感性高、特异性强、快速等优点，已广泛应用于临床诊断。
血清学检测：常用的方法有补体结合试验、微量免疫荧光试验等，可检测血清中的特异性抗体。但血清学检测不能区分是现感染还是既往感染，一般用于流行病学调查或辅助诊断。

鼠抗沙眼衣原体单克隆抗体是一种通过细胞融合技术制备的、能够特异性识别沙眼衣原体抗原的抗体，在沙眼衣原体的检测、诊断和相关研究中具有重要作用。
制备过程
免疫小鼠：选择合适品系的小鼠，如 Balb/c 小鼠，用纯化的沙眼衣原体抗原或其特定抗原成分对小鼠进行免疫。通常采用多次皮下或腹腔注射的方式，按照一定的免疫程序进行免疫，以刺激小鼠的免疫系统产生针对沙眼衣原体抗原的 B 淋巴细胞。
细胞融合：在末次免疫后一段时间，取免疫小鼠的脾脏细胞，与骨髓瘤细胞在聚乙二醇（PEG）等融合剂的作用下进行细胞融合，形成杂交瘤细胞。这些杂交瘤细胞同时具备了 B 淋巴细胞产生特异性抗体的能力和骨髓瘤细胞无限增殖的特性。
筛选阳性杂交瘤细胞：通过特定的筛选方法，如酶联免疫吸附试验（ELISA），利用包被的沙眼衣原体抗原筛选出能够分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。之后再采用有限稀释法等进行亚克隆，进一步筛选出稳定分泌高亲和力抗体的杂交瘤细胞株。
抗体生产与纯化：对筛选出的阳性杂交瘤细胞株进行扩大培养，可以通过体内培养（将细胞接种到小鼠腹腔内，形成腹水，从腹水中获取抗体）或体外培养（利用细胞培养技术在生物反应器中大量培养细胞，收集培养液获得抗体）的方法生产抗体。然后采用亲和层析、凝胶过滤等方法对抗体进行纯化，得到高纯度的鼠抗沙眼衣原体单克隆抗体。
应用
诊断：可用于沙眼衣原体感染的快速诊断，如免疫荧光法（IFA）、免疫酶法（EIA）等。在这些方法中，利用单克隆抗体特异性识别沙眼衣原体抗原的特性，通过荧光标记或酶标记的抗体与样本中的沙眼衣原体抗原结合，再通过荧光显微镜或酶标仪等设备进行检测，能够快速、准确地检测出样本中是否存在沙眼衣原体。
研究：在沙眼衣原体的基础研究中，鼠抗沙眼衣原体单克隆抗体可用于研究沙眼衣原体的生物学特性、致病机制、抗原结构等方面。例如，通过免疫印迹（Western blot）技术分析沙眼衣原体的抗原成分，利用免疫细胞化学技术观察沙眼衣原体在细胞内的定位和繁殖过程等。

免疫荧光法（IFA）
样本准备：对于细胞样本，将培养的细胞固定在载玻片上；对于组织样本，通常需要进行切片、固定等处理，以保持细胞和组织的形态结构，并使抗原能够充分暴露。
抗体孵育：将鼠抗沙眼衣原体单克隆抗体稀释至合适浓度，滴加在样本上，使其与样本中的沙眼衣原体抗原充分结合。一般在湿盒中于 37℃孵育 1 - 2 小时或 4℃过夜，以保证抗体与抗原的特异性结合。孵育后用缓冲液充分洗涤，去除未结合的抗体。
荧光标记二抗孵育：加入荧光素标记的羊抗鼠 IgG 抗体（二抗），与结合在抗原上的鼠抗沙眼衣原体单克隆抗体结合。同样在湿盒中于 37℃孵育 30 - 60 分钟，然后洗涤去除未结合的二抗。常用的荧光素有异硫氰酸荧光素（FITC）、罗丹明等，它们在特定波长的激发光下会发出不同颜色的荧光，便于观察。
观察与分析：使用荧光显微镜观察样本，在相应的荧光通道下，若样本中存在沙眼衣原体抗原，可观察到特异性的荧光信号，根据荧光的分布和强度来判断沙眼衣原体的存在和定位。例如，在细胞内观察到沙眼衣原体包涵体发出明亮的荧光，可确定细胞被沙眼衣原体感染。
免疫印迹法（WB）
蛋白样品制备：首先将含有沙眼衣原体抗原的样本（如沙眼衣原体感染的细胞裂解物或培养物）进行处理，通过超声破碎、化学裂解等方法使细胞破裂，释放出蛋白质。然后进行离心，取上清液作为蛋白样品，并测定蛋白浓度。
SDS - PAGE 电泳：将蛋白样品与上样缓冲液混合，加热使蛋白质变性，然后进行十二烷基硫酸钠 - 聚丙xi酰胺凝胶电泳（SDS - PAGE）。在电场作用下，蛋白质根据其分子量大小在凝胶中分离，形成不同的条带。
转膜：电泳结束后，通过电转印的方法将凝胶中的蛋白质转移到硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上。这样可以使蛋白质固定在膜上，便于后续的抗体检测。
封闭：将转印后的膜用含有脱脂奶粉或牛血清白蛋白（BSA）的封闭液进行封闭，以防止非特异性抗体结合。一般在室温下封闭 1 - 2 小时。
抗体孵育：将膜与鼠抗沙眼衣原体单克隆抗体孵育，该抗体能够特异性识别膜上的沙眼衣原体抗原。通常在室温下孵育 1 - 2 小时或 4℃过夜，然后用洗涤液充分洗涤膜，去除未结合的抗体。
酶标二抗孵育：加入辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）标记的羊抗鼠 IgG 抗体（二抗），与结合在抗原上的鼠抗沙眼衣原体单克隆抗体结合。室温下孵育 1 - 2 小时后，再次洗涤膜。
显色：根据标记酶的不同，选择相应的底物进行显色。如使用 HRP 标记的二抗，可加入二氨基联BEN胺（DAB）底物，在酶的作用下，DAB 会发生显色反应，使含有沙眼衣原体抗原的条带呈现出棕色。通过观察条带的位置和颜色深浅，可以分析沙眼衣原体抗原的分子量大小和表达量。
免疫组化
组织切片准备：将组织样本切成薄片，通常厚度为 3 - 5 微米，然后进行脱蜡、水化等处理，以去除组织中的石蜡，并使组织恢复到水合状态，便于抗体进入组织内部与抗原结合。
抗原修复：由于在组织固定和处理过程中，部分抗原表位可能被掩盖，需要进行抗原修复。常用的方法有高温高压修复、微波修复等，通过这些方法使抗原表位重新暴露，提高抗体的结合效率。
内源性酶和非特异性结合的阻断：为了避免组织内源性过氧化物酶或碱性磷酸酶对结果的干扰，需要用相应的抑制剂进行处理。同时，用正常血清或 BSA 等进行封闭，以减少非特异性抗体结合。
抗体孵育：将鼠抗沙眼衣原体单克隆抗体稀释至合适浓度，滴加在组织切片上，在湿盒中于 37℃孵育 1 - 2 小时或 4℃过夜，使抗体与组织中的沙眼衣原体抗原特异性结合。孵育后用缓冲液充分洗涤切片。
酶标二抗孵育：加入与鼠抗沙眼衣原体单克隆抗体对应的酶标二抗，如 HRP 或 AP 标记的羊抗鼠 IgG 抗体，室温下孵育 30 - 60 分钟，然后洗涤切片。
显色与复染：加入显色底物，使结合了抗体的沙眼衣原体抗原所在部位显色，如使用 DAB 显色剂可使阳性部位呈现棕色。显色后，用苏mu精等进行复染，以显示细胞核等其他细胞结构，便于观察。最后用中性树胶封片，在显微镜下观察，根据显色情况判断沙眼衣原体抗原在组织中的分布和定位。

该抗体可应用于ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。
亚 型：IgG2a，IgM，IgG2b，IgG1
来源：BALB/C小鼠
免疫原： 沙眼衣原体全病毒或其他分型
可用于免疫荧光，WB,ELISA,等科研项目
规格：1mg/瓶，纯度>95%
推荐使用浓度： 胶体金： 5微克/ml金液；
【工作效价】 
ELISA法：1：500~5000
免疫印迹：1：200~5000。
免疫组化：1：20~500。
标记二抗的使用浓度：国产1:100-1:500；进口1:1000-1:5000
具体效价以产品标签为准，Z佳使用条件需根据所检测样本的抗原及一抗效价优化而定。
纯化方式：亲和层析纯化
来源： balb/c小鼠
缓冲液：0.01PBS+保护剂
【常见问题】
1. 包被抗体或抗原不适，易产生阳性值较小，或产生变异，即跳管现象。
2. 用抗血清不纯化，或纯化程度太低的抗体包被，则阳性值较小，或没有阳性梯度。
3. 封闭不好或标记物过浓可产生对照值较高。
【保存条件】-20℃保存，保持期为24个月.