猪塞内加谷（SVA）病毒蛋白；猪塞内加谷病毒VP1蛋白；猪塞内加谷病毒VP2蛋白；猪塞内加谷抗原；猪SVA抗原

塞内加谷病毒（Senecavirus A,SVA）是一种新发现的能引起猪水泡性疾病的一种小 RNA 病毒，属于小核糖核酸病毒科，

塞内加谷病毒属。其临床症状与口蹄疫、猪水泡病、水疱性口炎等病毒性疾病相似，所以临床诊断难度大。

SVA 最早是在细胞培养物中偶然发现，2014 年在巴西爆发，导致大量仔猪死亡。2015 年中国也首次分离到 SVA 中国毒株，

目前国内对 SVA 的认识尚浅，为预防大规模爆发对养殖业的影响，有必要加强感染的临床诊断及疫苗研制。

SVA VP1 蛋白是诱导中和抗体的主要成分，是抗原变异的关键结构蛋白，其核苷酸易发生变异，具有重要的抗原位点。

病毒基本信息

病毒分类：属于小 RNA 病毒科塞内加谷病毒属。

病毒形态：病毒粒子呈二十面体对称结构，无包膜，直径约为 28 - 30nm。

基因组结构：为单股正链 RNA，全长约 7.4 - 7.5kb，包含一个大的开放阅读框（ORF），编码多聚蛋白，该多聚蛋白可进一步切割成多种结构蛋白和非结构蛋白。

检测技术参数

核酸检测：

RT - PCR：是常用的检测方法，其引物设计通常针对病毒的保守区域，如 VP1 基因等。反应条件一般包括逆转录步骤，如 42℃ 30 - 60 分钟，然后进行 PCR 扩增，94℃预变性 3 - 5 分钟，接着 94℃变性 30 - 60 秒、55 - 60℃退火 30 - 60 秒、72℃延伸 30 - 60 秒，共进行 30 - 40 个循环，最后 72℃延伸 5 - 10 分钟。该方法的灵敏度较高，可检测到低至 10 - 100 拷贝 /μL 的病毒核酸。

荧光定量 RT - PCR：能更准确地定量检测病毒核酸。其反应体系和步骤与普通 RT - PCR 类似，但加入了荧光探针或荧光染料。通过标准曲线的建立，可以精确测定样品中的病毒载量，检测下限可达 1 - 10 拷贝 /μL。

血清学检测：

ELISA：可用于检测猪血清中的 SVA 抗体。包被抗原通常为病毒的结构蛋白，如 VP1 蛋白。酶标二抗一般为辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗猪 IgG。反应条件为 37℃孵育 1 - 2 小时，然后用底物显色，在 450nm 波长下读取吸光度值。该方法的特异性和敏感性较高，与其他猪病毒抗体的交叉反应率低至 5% 以下。

中和试验：是检测病毒抗体中和活性的经典方法。将不同稀释度的血清与一定量的病毒混合，孵育后接种到细胞培养物中，观察细胞病变效应（CPE）。能使 50% 细胞免受病毒感染的血清稀释度即为中和抗体效价。该方法的准确性高，但操作较为繁琐，耗时较长。

疫苗相关参数

疫苗类型：目前有灭活疫苗、亚单位疫苗和核酸疫苗等研究。

灭活疫苗：通常采用甲醛等试剂对病毒进行灭活处理。灭活后的病毒失去感染性，但保留了免疫原性。疫苗中病毒抗原含量一般为 10 - 100μg/mL。

亚单位疫苗：主要以病毒的结构蛋白如 VP1 蛋白为抗原，通过基因工程技术在体外表达并纯化。抗原纯度可达 95% 以上，疫苗中抗原含量一般为 5 - 20μg/mL。

核酸疫苗：将编码病毒抗原的基因片段克隆到真核表达载体中，制成核酸疫苗。疫苗中 DNA 含量一般为 100 - 500μg/mL。

免疫效果：

免疫保护率：优质的疫苗在免疫后，能使猪群对 SVA 的攻击产生 80% - 90% 以上的保护率。

抗体产生时间：灭活疫苗免疫后，一般 7 - 10 天开始产生抗体，14 - 21 天抗体水平达到较高值；亚单位疫苗和核酸疫苗免疫后，抗体产生时间可能稍晚，一般在 10 - 14 天开始产生，21 - 28 天达到较高水平。

抗体持续时间：灭活疫苗诱导的抗体可持续 6 - 8 个月，亚单位疫苗和核酸疫苗诱导的抗体可持续 4 - 6 个月，之后需要进行加强免疫。

细胞培养参数

细胞系选择：常用的细胞系有 PK - 15（猪肾细胞系）、Vero（非洲绿猴肾细胞系）等。

培养条件：细胞培养一般使用含 10% 胎牛血清的 DMEM（杜氏改良 Eagle 培养基）或 MEM（ Eagle 基本培养基），在 37℃、5% CO₂的培养箱中培养。

病毒接种与培养：将病毒接种到对数生长期的细胞中，接种量一般为 0.1 - 1 MOI（感染复数）。接种后，在 37℃继续培养，观察细胞病变效应，一般在 24 - 72 小时内可出现明显的 CPE，如细胞变圆、脱落等。收集病变细胞及其培养上清，可用于病毒的进一步研究或疫苗生产等。

塞内加谷病毒（Seneca Valley Virus，SVV）主要有以下几种蛋白，其分子结构与分子量等相关参数如下：

VP1 蛋白

分子量：约 30kDa。

分子结构

一级结构：由多个氨基酸按照特定顺序排列组成，是病毒的主要抗原蛋白，其氨基酸序列中的一些区域对于病毒与宿主细胞的相互作用、抗原性等具有重要意义。

二级结构：包含 α- 螺旋、β- 折叠、β- 转角和无规卷曲等结构元件，这些结构通过氨基酸之间的氢键等相互作用维持稳定，对 VP1 蛋白的空间构象和功能有重要作用。

三级结构：VP1 蛋白在二级结构基础上进一步折叠、盘曲形成特定的三维空间结构，通过氨基酸残基之间的疏水作用、离子键、范德华力等相互作用维持，使 VP1 蛋白能够在病毒粒子表面形成特定的抗原表位，可被宿主免疫系统识别，诱导免疫反应。

VP2 蛋白

分子量：约 28kDa。

分子结构

一级结构：由特定序列的氨基酸组成，在病毒粒子的组装和结构稳定中发挥作用。

二级结构：具有多种结构元件，与 VP1 等其他蛋白的二级结构相互作用，共同维持病毒粒子的整体结构。

三级结构：折叠成特定的空间形状，与 VP1 和 VP3 蛋白相互作用，参与形成病毒的二十面体衣壳结构，其表面的一些区域可能与病毒的细胞吸附等过程有关。

VP3 蛋白

分子量：约 22kDa。

分子结构

一级结构：由特定的氨基酸序列构成，是组成病毒衣壳的重要成分。

二级结构：存在 α- 螺旋和 β- 折叠等结构，这些结构有助于 VP3 蛋白与 VP1、VP2 蛋白相互作用。

三级结构：VP3 蛋白形成的三维结构使其能够在病毒衣壳内部与其他蛋白紧密结合，对维持病毒衣壳的稳定性和完整性至关重要，并且可能在病毒感染细胞后的脱壳过程中发挥一定作用。

VP4 蛋白

分子量：相对较小，约 8kDa。

分子结构

一级结构：由较少的氨基酸组成，但在病毒的生命周期中具有特定功能。

二级结构：可能具有简单的 α- 螺旋或 β- 折叠结构，与病毒的核酸结合或在病毒粒子的组装过程中起辅助作用。

三级结构：折叠成能够与病毒核酸及其他结构蛋白相互作用的结构，在病毒粒子内部与病毒 RNA 结合，对病毒基因组起到一定的保护作用。

3D 蛋白

分子量：约 50kDa。

分子结构

一级结构：由较多氨基酸组成，是病毒的 RNA 依赖的 RNA 聚合酶，其氨基酸序列中的特定区域负责与病毒 RNA 模板结合、核苷酸的结合与催化等功能。

二级结构：包含多个 α- 螺旋和 β- 折叠结构，这些结构形成了 3D 蛋白的活性中心和底物结合位点。

三级结构：具有复杂的三维结构，形成了能够特异性识别病毒 RNA 模板、结合核苷酸并催化 RNA 合成的活性区域，在病毒的复制过程中起着核心作用。

表达载体： 杆状病毒载体 

蛋白纯度： 大于95%（SDS-PAGE电泳）

品牌：PhyCell/费雪

规格：0.5mg,1mg

该抗原可应用于ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。

蛋白浓度：＞1mg/ml，具体视批次而定

缓冲液：0.01M PBS PH7.4无防腐剂

储存条件：-20℃以下

稳 定 性： 冻融一次复检合格，有效期三年

本产品仅供研究使用，不适用于人类、治疗或诊断应用。