沙丁胺醇单克隆抗体;Salbutamol(SAL)抗体 2F8细胞株
英文名称:Salbutamol(SAL)
沙丁胺醇(SAL)单抗(2F8细胞株),灵敏度高,效价高,间接竞争ELISA结果显示其IC50值约为0.5ppb。
沙丁胺醇单克隆抗体 (2F8细胞株);沙丁胺醇抗体;Salbutamol(SAL)抗体;SAL抗体;沙丁胺醇抗原
沙丁胺醇抗原是用于检测沙丁胺醇残留的关键物质,在食品安全检测和药物残留分析等领域具有重要作用。
基本结构与特点
沙丁胺醇是一种 β - 肾shang腺素能受体激动剂,其化学结构包含苯乙chun胺骨架,具有特定的官能团和立体构型。沙丁胺醇抗原通常是将沙丁胺醇分子通过适当的化学方法与载体蛋白(如牛血清白蛋白、卵清蛋白等)偶联而成。这种偶联抗原既保留了沙丁胺醇的免疫原性部分结构,又借助载体蛋白增强了其免疫原性,能够引发动物机体产生针对沙丁胺醇的特异性免疫反应。
制备方法
选择载体蛋白:常用的载体蛋白有牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、钥孔血蓝蛋白(KLH)等。BSA 来源广泛、免疫原性较好,是较为常用的载体蛋白。
活化沙丁胺醇:沙丁胺醇分子上通常需要引入能够与载体蛋白反应的活性基团。例如,可以通过对沙丁胺醇的羟基、氨基等官能团进行化学修饰,使其具有可与载体蛋白上的氨基、羧基等发生反应的活性。
常见的方法是使用wu二醛、碳二亚胺等交联剂,将沙丁胺醇分子上的羟基转化为醛基等活性基团。
偶联反应:将活化后的沙丁胺醇与载体蛋白在适当的条件下混合反应。例如,在碱性条件下,沙丁胺醇上的活性基团与载体蛋白上的氨基发生缩合反应,形成稳定的共价键,从而得到沙丁胺醇 - 载体蛋白偶联物,即沙丁胺醇抗原。反应完成后,通常需要通过透析、凝胶过滤等方法去除未反应的沙丁胺醇和交联剂等小分子物质,以获得纯化的沙丁胺醇抗原。
应用
免疫检测:沙丁胺醇抗原主要用于制备特异性抗体,进而建立各种免疫检测方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫层析法、免疫传感器等,用于检测食品(如肉类、水产品等)中的沙丁胺醇残留。这些方法具有灵敏度高
特异性强、操作简便等优点,能够快速有效地检测出样品中微量的沙丁胺醇,有助于保障食品安全,防止因食用含有过量沙丁胺醇的食品而对人体健康造成危害。
兽药残留监控:在畜牧业中,沙丁胺醇常被用作瘦rou精,违规使用可能导致动物组织中药物残留。通过使用基于沙丁胺醇抗原的检测方法,可以对动物源性食品中的沙丁胺醇残留进行监控,加强对兽药使用的管理,规范养殖行为,确保动物产品的质量安全。
沙丁胺醇单克隆抗体(2F8 细胞株)是针对沙丁胺醇这一特定抗原产生的单克隆抗体,由 2F8 细胞株分泌。
细胞株来源与特性
来源:2F8 细胞株是通过细胞融合技术构建的。通常将免疫后的小鼠脾细胞(这些脾细胞中含有能产生针对沙丁胺醇抗体的 B 淋巴细胞)与骨髓瘤细胞进行融合,经过筛选和克隆化培养,得到能稳定分泌特异性抗沙丁胺醇单克隆抗体的 2F8 细胞株。
特性:2F8 细胞株具有永生性,能够在体外持续培养并大量增殖,同时保持分泌沙丁胺醇单克隆抗体的能力。该细胞株所分泌的抗体具有高度的特异性和均一性,只针对沙丁胺醇这一特定抗原表位产生免疫反应,能够准确识别和结合沙丁胺醇分子,而对其他结构类似的化合物具有较低的交叉反应性。
抗体特点
高特异性:对沙丁胺醇具有高度特异性识别能力,能准确区分沙丁胺醇与其他 β - 肾shang腺素能受体激动剂或结构相似的化合物,可有效避免假阳性结果,在复杂样品检测中能精准检测出沙丁胺醇。
高亲和力:与沙丁胺醇具有较强的结合能力,即使在样品中沙丁胺醇浓度较低的情况下,也能高效结合,从而保证检测的灵敏度,可检测出极低浓度的沙丁胺醇残留。
可大量制备:由于 2F8 细胞株可在体外大规模培养,因此能够大量生产单克隆抗体,满足科研、检测等不同领域的需求。
应用领域
免疫检测:是构建沙丁胺醇免疫检测方法的关键试剂,如用于酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫层析试纸条、化学发光免疫分析等检测技术中,可实现对食品、生物样本中沙丁胺醇的快速、灵敏检测。例如在肉类、动物尿液等样品检测中,能快速筛查出是否含有沙丁胺醇残留,为食品安全监管和兽药残留监控提供有力技术支持。
免疫亲和层析:可用于制备免疫亲和柱,利用抗体与沙丁胺醇的特异性结合作用,从复杂样品中选择性地富集和分离沙丁胺醇,实现样品的净化和浓缩,为后续的仪器分析(如液相色谱 - 质谱联用)提供高质量的样品,提高检测的准确性和可靠性。
药物研发:在研究沙丁胺醇的作用机制、药物代谢等方面有重要作用。通过与沙丁胺醇特异性结合,可用于追踪药物在生物体内的分布、代谢过程,有助于深入了解药物的药理作用和毒理学特性,为优化药物设计和临床应用提供参考。
制备与保存
制备:通常采用细胞培养的方法,将 2F8 细胞株在合适的细胞培养基中进行培养,添加必要的生长因子和营养物质,维持细胞的生长和代谢。通过优化培养条件,如温度、pH 值、气体环境等,促进细胞的增殖和抗体分泌。当细胞生长到一定密度且抗体分泌达到较高水平时,收集细胞培养液,经过离心、过滤等初步处理后,采用蛋白质纯化技术,如亲和层析、离子交换层析等方法,对抗体进行纯化,得到高纯度的沙丁胺醇单克隆抗体。
保存:纯化后的沙丁胺醇单克隆抗体需要在合适的条件下保存,以保持其活性和稳定性。一般将抗体溶液保存在 4℃或 - 20℃冰箱中,避免反复冻融。为防止微生物污染,可在抗体溶液中添加适量的防腐剂。在长期保存过程中,还需定期检测抗体的活性和纯度,确保其质量符合使用要求。