专业集萃 赋能研发
Strictly control every link to ensure scientific research quality.——
产品中心 PRODUCT
氯霉素单克隆抗体(23E10细胞株),Chloromycetin(CAP)/Chloramphenicol(TAP )抗体/ 氯霉素偶联抗原
英文:Chloromycetin(CAP)/Chloramphenicol(TAP )
氯霉素(CAP)单抗(23E10细胞株);氯霉素单克隆抗体(23E10细胞株);氯霉素抗体; Chloromycetin(CAP)抗体;Chloramphenicol(TAP )抗体
Chloromycetin(CAP)/Chloramphenicol(TAP )氯霉素(CAP)单抗(23E10细胞株)
氯霉素抗原是一类与氯霉素相关的能够引发免疫反应的物质:
结构特点
氯霉素的化学结构为 D - 苏式 - ( - ) - N - [α - (羟基甲基) - β - 羟基 - 对硝基BEN乙基] - 2,2 - 二氯乙酰胺。作为半抗原,氯霉素本身分子量较小,不具备完全的免疫原性,需要与载体蛋白(如牛血清白蛋白、卵清蛋白等)结合形成偶联物,才能成为完整的抗原,刺激机体产生特异性免疫反应。其关键结构特征在于对硝JI BEN基、二氯乙酰基和丙二醇胺醇侧链,这些结构部分在与抗体结合以及引发免疫识别过程中起着重要作用。
制备方法
载体蛋白选择:常用的载体蛋白有牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)、钥孔血蓝蛋白(KLH)等。BSA 由于其良好的免疫原性、水溶性以及易于获取和偶联等特点,较为常用。
偶联方法:通常采用化学偶联法,如碳二亚胺法(EDC 法)。该方法利用 EDC 将氯霉素分子上的羧基( - COOH)与载体蛋白上的氨基( - NH₂)进行缩合反应,形成稳定的酰胺键,从而使氯霉素与载体蛋白连接在一起。也可以使用wu二醛法,通过wu二醛的两个醛基分别与氯霉素和载体蛋白上的氨基反应,形成 Schiff 碱,实现两者的偶联。
应用领域
免疫检测:用于制备氯霉素的免疫检测试剂,如酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒、免疫层析试纸条等。将氯霉素抗原包被在固相载体(如酶标板、硝酸纤维素膜等)上,利用其与样品中氯霉素抗体的特异性结合,再通过酶标记的二抗或其他检测手段,实现对样品中氯霉素残留量的定性或定量检测。这种方法具有快速、灵敏、特异性强等优点,广泛应用于食品、环境、药品等领域中氯霉素残留的检测。
免疫分析:在免疫分析研究中,氯霉素抗原可用于研究抗体与抗原的结合特性、免疫识别机制等基础免疫学问题。通过对氯霉素抗原进行标记(如荧光标记、放射性标记等),可以追踪其在免疫反应中的动态变化,了解抗体的产生、分布以及与抗原的相互作用过程。
疫苗研发:理论上,以氯霉素抗原为基础,可尝试研发针对氯霉素的疫苗,用于动物或人体,使其产生特异性抗体,从而对氯霉素类药物的毒性或感染产生一定的抵抗作用。但目前这方面的研究相对较少,主要集中在动物实验阶段,且面临着诸多技术挑战和安全性问题。
质量控制
偶联效率检测:采用光谱分析法,如紫外 - 可见分光光度法,通过测定偶联前后样品在特定波长下的吸光度变化,计算氯霉素与载体蛋白的偶联比例,一般要求偶联效率达到一定水平,以保证抗原的免疫原性。也可以使用 SDS - 聚丙xi酰胺凝胶电泳(SDS - PAGE),观察偶联物的分子量变化,判断偶联是否成功。
免疫原性评估:将制备好的氯霉素抗原免疫动物(如小鼠、兔子等),定期采集动物血清,通过 ELISA 等方法检测血清中特异性抗体的滴度。如果抗体滴度达到一定水平,说明抗原具有良好的免疫原性。同时,还可以观察动物的免疫反应情况,如有无发热、局部红肿等不良反应,综合评估抗原的质量。
稳定性检测:将氯霉素抗原在不同条件下保存,如不同温度(4℃、 - 20℃、 - 80℃等)、不同时间点,定期检测其免疫活性和结构稳定性。通过 ELISA 检测其与抗体的结合能力,以及采用物理化学方法(如光谱分析、凝胶电泳等)检测其结构是否发生变化,确保抗原在一定保存期内保持稳定的质量和活性。
氯霉素(CAP)单抗(23E10 细胞株)是一种针对氯霉素的单克隆抗体,由 23E10 细胞株产生,在氯霉素检测和相关研究中具有重要作用。:
细胞株特性
来源:23E10 细胞株是通过将免疫后的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经过筛选和克隆化得到的。具体过程是用氯霉素抗原免疫小鼠,使小鼠产生免疫反应,脾细胞中产生针对氯霉素的 B 淋巴细胞,然后将这些脾细胞与骨髓瘤细胞融合,形成能无限增殖且分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,23E10 细胞株就是其中筛选出的能够稳定分泌抗氯霉素单克隆抗体的细胞株。
生长特性:该细胞株在体外培养时,具有典型的杂交瘤细胞生长特点。它能在合适的培养基中快速增殖,通常呈悬浮生长或贴壁生长,具体生长方式可能因培养条件和细胞适应情况有所不同。在对数生长期,细胞增殖速度较快,需要定期传代以维持细胞的生长和活性。一般来说,细胞的倍增时间在一定范围内相对稳定,这有利于大规模培养以生产足够的单抗。
稳定性:23E10 细胞株具有较好的遗传稳定性,在多次传代过程中,能够稳定地分泌抗氯霉素单克隆抗体,其抗体的特异性和亲和力等特性不会因传代次数的增加而发生明显改变。这使得该细胞株适合长期保存和用于工业化生产单抗。
单抗特性
特异性:氯霉素(CAP)单抗(23E10 细胞株)对氯霉素具有高度特异性,能够准确识别氯霉素分子的特定抗原决定簇,与其他结构类似的抗生素如甲砜霉素等几乎无交叉反应。这使得它在复杂样品中检测氯霉素时,具有很高的准确性和可靠性。
亲和力:该单抗与氯霉素之间具有较强的亲和力,能快速、牢固地结合。其亲和力常数通常处于较高水平,这保证了即使在氯霉素浓度较低的情况下,单抗也能有效地与之结合,从而实现对低浓度氯霉素的检测。
免疫活性:具有良好的免疫活性,在各种免疫检测方法如酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫层析等中,能够有效地与氯霉素抗原结合,并通过相应的标记物(如酶标二抗、胶体金等)产生明显的检测信号,从而实现对氯霉素的定性或定量分析。
应用领域
残留检测:在食品安全检测领域,常用于检测食品中的氯霉素残留。由于氯霉素对人体有潜在的危害,许多国家和地区都严格限制其在食品生产中的使用。该单抗可用于开发各种检测试剂盒,如 ELISA 试剂盒、免疫层析试纸条等,方便快捷地对肉类、蛋类、奶类等食品中的氯霉素残留进行现场快速筛查或实验室定量分析。在环境监测中,也可用于检测水体、土壤等环境样品中的氯霉素残留,以评估环境中氯霉素的污染状况。
免疫分析:在基础免疫学研究中,作为工具用于研究氯霉素与抗体的相互作用机制、抗原 - 抗体复合物的结构等。通过与标记的氯霉素或其他相关试剂结合,可用于免疫细胞化学、免疫沉淀等实验,帮助深入了解免疫系统对抗原的识别和应答过程。
药物研发:在药物研发方面,可用于研究氯霉素的药代动力学和药物分布。例如,通过标记单抗,追踪氯霉素在动物模型或人体中的吸收、分布、代谢和排泄情况,为优化氯霉素的临床用药方案提供依据。此外,也可作为阳性对照或标准品,用于评估新开发的氯霉素检测方法或药物分析技术的准确性和可靠性。
生产与保存
生产:通常采用细胞培养技术进行大规模生产。将 23E10 细胞株接种到合适的细胞培养基中,在生物反应器或细胞培养瓶中进行培养。通过优化培养条件,如控制温度、pH 值、溶氧等参数,以及添加适当的营养物质和生长因子,促进细胞的生长和单抗的分泌。培养过程中,需要定期监测细胞的生长状态和单抗的产量、质量,当单抗产量达到一定水平时,收集细胞培养液,通过离心、过滤等方法去除细胞碎片和杂质,然后采用亲和层析、离子交换层析等方法对单抗进行纯化,得到高纯度的氯霉素(CAP)单抗。
保存:纯化后的单抗通常保存在低温环境下,如 - 20℃或 - 80℃,以防止抗体降解和失活。在保存过程中,可添加一些保护剂如甘油、牛血清白蛋白等,有助于维持单抗的稳定性。对于短期使用的单抗,也可在 4℃保存,但保存时间不宜过长,以免影响其活性。此外,应避免反复冻融,因为这可能会导致抗体的结构破坏和活性降低。
性状;液体
来 源:Balb/c 小鼠
亚 型:IgG2a
胶体金灵敏度:1-3ng/ml
ELISA IC50: 0.2-0.3ppb
规格:1mg
品牌:PhyCell/费雪
该抗体可应用于ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。
ELISA效价: 0.005M PBS 体系下1:5000 以上
缓冲液:0.01M PBS PH7.4
储存条件:-20℃以下
有效期:3年,-20℃以下保存