呋喃唑酮代谢物-BSA(OVA）偶联抗原；2-CPAOZ-BSA(OVA）偶联抗原

英文名称：2-Furazolidone  metabolite（2-CPAOZ）

呋喃唑酮代谢物 - BSA（OVA）偶联抗原是将呋喃唑酮代谢物与牛血清白蛋白（BSA）或卵清蛋白（OVA）通过化学方法连接起来的生物制剂，在免疫检测领域有着重要作用。

组成成分

呋喃唑酮代谢物：呋喃唑酮是一种硝基呋喃类抗生素，在动物体内会代谢生成多种代谢物，其中主要的免疫活性代谢物为 3 - 氨基 - 2 - 恶唑烷基酮（AOZ）。AOZ 本身是小分子物质，免疫原性较弱，需要与载体蛋白偶联才能引发机体的免疫反应。

BSA 或 OVA：作为载体蛋白，它们是大分子蛋白质，具有多个可用于偶联的官能团，如氨基、羧基等。其作用是增加呋喃唑酮代谢物的分子量和免疫原性，使免疫系统能够识别并产生针对呋喃唑酮代谢物的特异性抗体。

制备方法

活化呋喃唑酮代谢物：通常先将 AOZ 进行衍生化处理，使其具有能与载体蛋白反应的活性基团。例如，通过在酸性条件下，使 AOZ 与碳二亚胺类试剂反应，将其氨基活化，形成具有较高反应活性的中间体。

偶联反应：将活化后的呋喃唑酮代谢物与 BSA 或 OVA 在适当的缓冲溶液中混合。在一定的温度和 pH 条件下，代谢物上的活性基团与载体蛋白上的氨基、羧基等发生缩合反应或其他共价结合反应，形成稳定的化学键，从而将呋喃唑酮代谢物偶联到载体蛋白上。以与 BSA 的偶联为例，可能是代谢物的活化基团与 BSA 分子中赖氨酸残基的氨基形成酰胺键等连接方式。

纯化：反应结束后，采用透析、凝胶过滤等方法除去未反应的呋喃唑酮代谢物、试剂以及副产物，得到纯化的呋喃唑酮代谢物 - BSA（OVA）偶联抗原。

应用

免疫检测：用于制备针对呋喃唑酮代谢物的特异性抗体。将偶联抗原免疫动物，如小鼠、兔子等，动物免疫系统会将其识别为外来抗原，产生针对呋喃唑酮代谢物的特异性抗体。这些抗体可应用于酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫层析等检测方法中，用于快速、灵敏地检测食品、生物样本等中的呋喃唑酮残留量，以保障食品安全和动物源性产品的质量安全。

免疫分析研究：在免疫分析研究中，呋喃唑酮代谢物 - BSA（OVA）偶联抗原可用于研究抗原 - 抗体相互作用的机制、免疫识别的特异性等基础免疫学问题。通过对其与相应抗体的结合特性进行研究，有助于深入理解免疫反应的本质，为免疫检测技术的优化和发展提供理论依据。

整体结构：呋喃唑酮代谢物 - BSA（OVA）偶联抗原是由呋喃唑酮代谢物通过共价键连接到 BSA 或 OVA 载体蛋白上形成的复合物。从宏观上看，它保留了载体蛋白的基本空间结构框架，同时在载体蛋白表面或内部结合了多个呋喃唑酮代谢物分子。

微观结构：以 BSA 为例，其本身是具有复杂三维结构的球状蛋白，由多条肽链通过二硫键等相互作用折叠而成，表面分布着众多氨基酸残基。呋喃唑酮代谢物（如 3 - 氨基 - 2 - 恶唑烷基酮，AOZ）通过特定的化学反应与 BSA 上的氨基酸残基相连。当 AOZ 偶联到 BSA 上后，会在 BSA 的结构中引入新的化学基团和空间位阻，可能会对 BSA 局部的氨基酸残基排列和电子云分布产生影响，但通常不会改变 BSA 整体的二级结构（如 α - 螺旋、β - 折叠等）和三级结构的基本特征。对于 OVA，其结构与 BSA 有所不同，但偶联后的原理类似，即呋喃唑酮代谢物连接到 OVA 的特定位置，在一定程度上改变其局部结构和性质。

偶联位点

呋喃唑酮代谢物的位点：呋喃唑酮代谢物 AOZ 主要利用其氨基（−NH 2）进行偶联反应。在制备偶联抗原时，通常先对 AOZ 进行活化，例如通过与一些活化试剂（如碳二亚胺类试剂）反应，使氨基转化为更具反应活性的形式，以便与载体蛋白上的官能团发生共价结合。

载体蛋白的位点：BSA 和 OVA 上可供偶联的位点主要是氨基酸残基上的官能团。其中，赖氨酸残基的氨基（−NH 2）是最常见的偶联位点。此外，天冬氨酸和谷氨酸残基的羧基（−COOH）、酪氨酸残基的酚羟基（−OH）等也可能参与偶联反应，但反应活性相对较低。在偶联过程中，活化后的 AOZ 与载体蛋白上的这些位点通过缩合反应等形成稳定的化学键，如酰胺键（当与氨基反应时）、酯键（当与羧基反应时）等，从而实现呋喃唑酮代谢物与载体蛋白的偶联。

偶联比

定义与测定方法：偶联比是指呋喃唑酮代谢物与载体蛋白的结合比例。测定偶联比的方法通常有分光光度法、荧光法等。以分光光度法为例，呋喃唑酮代谢物在特定波长下有特征吸收峰，载体蛋白在另一波长下有吸收峰。通过分别测定偶联物中呋喃唑酮代谢物和载体蛋白在各自特征波长下的吸光度，再根据标准曲线计算出各自的浓度，进而得出偶联比。

影响因素：

反应条件：反应的 pH 值、温度、时间以及反应物的浓度等都会影响偶联比。例如，反应 pH 值过高或过低可能会影响 AOZ 活化基团和载体蛋白上官能团的活性，一般在弱碱性条件下有利于偶联反应进行。温度过高可能导致蛋白变性或反应过度，温度过低则反应速率较慢。反应时间过短，偶联反应不完全，时间过长可能会导致非特异性结合增加。

呋喃唑酮代谢物与载体蛋白的浓度：两者的浓度比例直接影响偶联比。在一定范围内，增加呋喃唑酮代谢物的浓度，偶联比可能会提高，但过高的代谢物浓度可能会导致载体蛋白上的偶联位点饱和，同时增加非特异性结合的概率。

载体蛋白的性质：不同的载体蛋白，其分子大小、氨基酸组成和结构不同，可供偶联的活性基团数量和反应活性也有差异。一般来说，BSA 由于其分子较大，含有较多的赖氨酸残基，可供偶联的位点相对较多，可能会有较高的偶联比，而 OVA 的结构相对紧密，可供偶联的位点相对较少，偶联比可能相对较低。

常见范围：呋喃唑酮代谢物与 BSA（OVA）的偶联比通常在 5 - 20 之间较为常见，但具体的偶联比会因实验条件和要求的不同而有所差异。在实际应用中，需要通过实验优化来确定最佳的偶联比，以获得具有良好免疫原性和特异性的偶联抗原。例如，在制备用于免疫检测的呋喃唑酮代谢物 - BSA 偶联抗原时，可能需要通过预实验，分别制备不同偶联比的偶联物，然后用其免疫动物，检测抗体的效价和特异性，从而确定最佳偶联比。

品牌：PhyCell/费雪

规格：1mg

该抗体可应用于ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。

蛋白载体:牛血清白蛋白/卵清白蛋白/匙孔血蓝蛋白BSA/OVA/KLH

物理性状：液体，避免反复冻融

来 源:Balb/c 小鼠

ELISA效价：0.005M PBS 体系下1:500-1000

免疫层析效价： 1:40以上，偶联比大于1:60

蛋白浓度：5.0 mg/ml

缓冲液：0.01M PBS PH7.4无防腐剂

储存条件：-20℃以下