多西环素-BSA(OVA）偶联抗原；多西环素偶联抗原；多西环素抗原；Doxycycline BSA (OVA)

Doxycycline BSA (OVA) coupled antigen 多西环素，化学式为C22H24N2O8，常温下为黄色晶体。

品牌：PhyCell/费雪

多西环素是一种四环素类抗生素，具有广泛的抗菌谱和多种临床应用。

基本信息

别名：强力霉素、脱氧土霉素。

化学名称：6 - 甲基 - 4 - （二甲氨基） - 3,5,10,12,12a - 五羟基 - 1,11 - 二氧代 - 1,4,4a,5,5a,6,11,12a - 八氢 - 2 - 并四苯甲酰胺。

性状：常用其盐酸盐，为淡黄色或黄色结晶性粉末，无臭，味苦。在水中易溶，在乙醇中略溶。

药理作用

作用机制：多西环素进入细菌细胞后，与细菌核糖体 30S 亚基结合，阻止氨酰 - tRNA 进入 A 位，阻碍肽链的延长和细菌蛋白质合成，从而抑制细菌生长繁殖。此外，它还可能改变细菌细胞膜的通透性，使细胞内的核苷酸及其他重要物质外漏，

进一步抑制细菌代谢和繁殖。

抗菌谱：抗菌谱广，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制作用。对肺炎链球菌、溶血性链球菌、草绿色链球菌、葡萄球菌等革兰氏阳性菌，以及大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、沙门氏菌属、志贺氏菌属等革兰氏阴性菌有较好的抗菌活性。

同时，对支原体、衣原体、立克次体、螺旋体、放线菌等也有一定的抑制作用。

多西环素偶联抗原是将多西环素与载体蛋白通过一定的化学方法连接起来，用于制备抗体或免疫检测等。以下是其偶联相关的信息：

偶联方法及原理

通常采用碳二亚胺法进行偶联。多西环素分子结构中含有羧基（-COOH），载体蛋白（如牛血清白蛋白 BSA、卵清蛋白 OVA 等）表面含有氨基（-NH₂）。在碳二亚胺类试剂如 1 - 乙基 - 3 - （3 - 二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（EDC）的作用下，多西环素的羧基被激活，与载体蛋白上的氨基发生缩合反应，形成稳定的酰胺键，从而实现多西环素与载体蛋白的偶联。

偶联位点

多西环素分子中可供偶联的位点主要是其羧基。一般认为，多西环素的 7 位上的二甲氨基、12 位上的羰基与相邻的羟基形成的烯醇结构等，可能会影响其与载体蛋白的偶联反应以及后续抗原的免疫原性和抗体的特异性识别。因此，通过羧基进行偶联可以在一定程度上保留多西环素的特征结构，有利于后续产生针对多西环素特定结构的特异性抗体。

偶联比测定及影响因素

测定方法：常用紫外分光光度法测定偶联比。多西环素和载体蛋白在紫外光区有不同的吸收峰，通过测定偶联前后溶液在特定波长下的吸光度变化，并结合标准曲线，可计算出多西环素与载体蛋白的偶联比。例如，多西环素在 350nm 左右有特征吸收峰，而 BSA 在 280nm 处有吸收峰，通过分别测定偶联物在这两个波长下的吸光度，再根据相应的公式计算偶联比。

影响因素：偶联比受到多种因素的影响，包括多西环素与载体蛋白的浓度比例、反应时间、反应温度和 pH 值等。一般来说，当多西环素与载体蛋白的摩尔比在 5 - 20:1，反应 pH 值在 4 - 6 之间，温度控制在 4 - 37℃，反应时间为 6 - 24 小时时，可获得较为理想的偶联比。此外，不同的载体蛋白、多西环素的纯度以及反应容器的材质等也可能对偶联比产生一定的影响。